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abcam抗体鉴定
日期:2024-04-27 02:40
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摘要:
abcam抗体鉴定
荧光抗体在使用前应加以鉴定。鉴定指医学标记包括效价及荧光素与蛋白质的结合比率。抗体效价可以用琼脂双扩散法进行滴定,效价大于1:16者较为理想。荧光素与蛋白质结合比率(F/P)的测定和计算的基本方法是:将制备的荧光抗体稀释至A2801≈1.0,分别测读A280 (蛋白质特异吸收峰)和标记荧光素的特异吸收峰,按公式计算。
荧光抗体在使用前应加以鉴定。鉴定指医学标记包括效价及荧光素与蛋白质的结合比率。抗体效价可以用琼脂双扩散法进行滴定,效价大于1:16者较为理想。荧光素与蛋白质结合比率(F/P)的测定和计算的基本方法是:将制备的荧光抗体稀释至A2801≈1.0,分别测读A280 (蛋白质特异吸收峰)和标记荧光素的特异吸收峰,按公式计算。
F/P值越高,说明抗体分子上结合的荧光素越多,反之则越少。一般用于固定标本的荧光抗体以F/P=1.5为宜,用于活细胞染色的以F/P=2.4为宜。
(abcam抗体)抗体工作浓度的确定方法类似ELISA间接法中酶标抗体的滴定。将荧光抗体自1:4~1:256倍比稀释,对切片标本作荧光抗体染色。以能清晰显示特异荧光、且非特异染色弱的*高稀释度为荧光抗体工作浓度。
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